产品简介：

  增强型转染试剂是在前几代转染试剂的基础上再次创新，包含最为先进的脂质体纳米颗粒技术，追求更优越的转染性能。增强型转染试剂具有更好的转染效率，并提高细胞活性，适用于较难转染及常见细胞的转染。

  产品特点：

  1. 更为优越的转染性能，为较难转染的细胞系提供了较高的转染效率;

  2. 对细胞更为温和，毒性更低;

  3 .较其他转染试剂具有更高的转染效率且用量低;

  4.适用细胞更为广泛。

  操作步骤：(以六孔板的贴壁细胞DNA转染为例)

  1. 细胞准备。转染前一天将细胞接种至六孔板内，细胞接种数量视其生长速度和细 6 胞系类型而定，一般为0.5-1×10 个细胞。转染时要求细胞生长的汇合度为70~90%，转 染前两小时对细胞进行换液。(细胞状态与转染效果影响很大，选择最佳的细胞状态更有利于转染效率提高和转染后细胞状态的恢复);

  2. 将3.75?l和7.5?l的R300-Lipo增强转染试剂分别加至另外125?l无血清的OPTI-MEM培养基中，轻轻混匀，室温静置2-3分钟;

  3. 将5?g质粒DNA (0.5-5?g/?L) 加入到250?l无血清OPTI-MEM培养基稀释，制备DNA 预混液匀，然后添加10 ?l RZ523-Lipo辅助试剂并充分混匀;

  4. 在每管已稀释的R300-Lipo增强转染试剂中加入等体积稀释的 DNA孵育10-15分钟;

  5.将DNA和R300-Lipo增强转染试剂混合液滴加至六孔板的孔内，前后左右晃动孔板混匀，置于培养箱中培养;

  6.转染18-48小时后，倒置荧光显微镜下观察荧光蛋白表达，或加入抗性培养基筛选稳定表达细胞系单克隆。

  用量参照表：

  1. 转染siRNA至细胞时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA 时不要加入R300辅助试剂。在无血清培养基中制备 DNA-R300-Lipo增强转染试剂复合物，直接将其加入含细胞培养基的细胞中(有无血清或抗生素均可);

  2. 转染后无需去除转染复合物或者更换/添加培养;

  3. 整个实验过程避免细胞污染，由于不同细胞耐受性不同，我们建议您在做批量实验前，可根据实际质粒和细胞的转染效率，分不同梯度量先做预实验，摸索最佳DNA和R300-Lipo增强转染试剂的混合比例。步骤里面测试推荐的两种浓度的并非固定浓度，优化后可根据自身细胞情况调整用量。